基因编辑平台

原理：

借助特异性DNA双链断裂（Double-strand Breaks, DSBs）激活细胞天然的修复机制，包括非同源末端连接（Non-homologous End Joining, NHEJ）和同源重组修复（Homologous Recombination, HR）两条机制。

NHEJ修复机制：断裂的DNA修复重连的过程会发生碱基随机的插入或丢失，造成移码突变使基因失活，实现目的基因敲除。如果一个外源性供体基因序列存在，NHEJ机制会将其连入双链断裂DSB位点，从而实现定点的基因敲入。

HR修复机制：在一个带有同源臂的重组供体存在的情况下，供体中的外源目的基因会通过同源重组过程完整地整合到靶位点，不会出现随机的碱基插入或丢失。如果在一个基因两侧同时产生DSB，在一个同源供体存在的情况下，可以进行原基因的替换。

基本技术：

CRISPR-Cas9技术是目前在科研、医疗领域中最有效、最便捷的基因编辑工具。

主要用途：

● 基因敲除：基因上产生DSB，在非同源末端连接修复过程中会产生DNA的插入或删除，从而造成移码突变。
● 突变引入：用含有特异突变的同源模板，位点产生DSB提高重组效率，从而实现特异突变的引入。
● 定点转基因：同源模板中加入转基因，在DSB修复过程中拷贝至基因组中，从而实现定点转基因。

主要特点：