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上海生物芯片有限公司

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产品服务

Product Service

基因编辑平台

网站首页  ꄲ  验证服务  ꄲ  基因编辑平台

 

原理:

借助特异性DNA双链断裂(Double-strand Breaks, DSBs)激活细胞天然的修复机制,包括非同源末端连接(Non-homologous End Joining, NHEJ)和同源重组修复(Homologous Recombination, HR)两条机制。

 

NHEJ修复机制:断裂的DNA修复重连的过程会发生碱基随机的插入或丢失,造成移码突变使基因失活,实现目的基因敲除。如果一个外源性供体基因序列存在,NHEJ机制会将其连入双链断裂DSB位点,从而实现定点的基因敲入。

 

HR修复机制:在一个带有同源臂的重组供体存在的情况下,供体中的外源目的基因会通过同源重组过程完整地整合到靶位点,不会出现随机的碱基插入或丢失。如果在一个基因两侧同时产生DSB,在一个同源供体存在的情况下,可以进行原基因的替换。

 

基本技术:

CRISPR-Cas9技术是目前在科研、医疗领域中最有效、最便捷的基因编辑工具。

 

主要用途:

● 基因敲除:基因上产生DSB,在非同源末端连接修复过程中会产生DNA的插入或删除,从而造成移码突变。
● 突变引入:用含有特异突变的同源模板,位点产生DSB提高重组效率,从而实现特异突变的引入。
● 定点转基因:同源模板中加入转基因,在DSB修复过程中拷贝至基因组中,从而实现定点转基因。

 

主要特点:

● sgRNA构建容易,操作简单,靶向精确性高

● 基因修饰率高,基因调控方式多样,例如敲除、插入、抑制、激活等

● 可对基因组精确定位和改造

● 可实现对靶基因多个位点同时敲除

● 无物种限制

● 成本低,效率高,实验周期短

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基因编辑是指对基因组中某一特定基因的DNA序列实现敲除、插入或替换的一种技术方法。
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