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去双胞又快又简单的方法--scDblFinder

 

双细胞(doublets):是指在单细胞微流控等流程中某个液滴中含有2个及以上的细胞,而在同一个液滴中的细胞在后续分析中带有相同的Cell Barcode,在分析中它们依旧会被当成同一个细胞的数据来处理。双细胞可以分为同型双细胞和异型双细胞,区别在于是否为相同细胞类型,其中异型双细胞会影响下游分析,目前大多数算法主要去除异型双细胞,比如Doubletfinder、Scrublet,以及今天要介绍的scDblFinder。个人认为其在准确性、速度、易用性上表现比较出色。

 

img1

 

研究者综合其他研究团队得到的bencmark结果,scDblFinder在平均AUPRC和AUROC值上表现最佳,并且在10%识别率下,其精确率(precision)、召回率(recall)和真阴性率(TNR)等指标也位居首位。

 

官网: https://plger.github.io/scDblFinder/

 

 

分析原理 

 

scDblFinder核心原理是通过生成人工双胞体数据(聚类模式/随机模式),并将其与真实细胞进行比较来识别潜在的双胞体。它结合了多种方法(如GBM、XGBoost、KNN),通过迭代分类器对真实细胞和人工双胞体的邻域进行训练,从而提高检测的准确性。

 

 

代码示例 

 

建议只对原始counts矩阵进行初步过滤,过严格的过滤会影响后续双细胞估计。

  • library(scDblFinder)
  • load("scRNA_harmony.Rdata")
  • sce <- as.SingleCellExperiment(scRNA_harmony)
  • # 这里采用多个样本,如果已知样本分类,也可以采用聚类模式
  • library(BiocParallel)
  • sce <- scDblFinder(sce, samples="orig.ident", BPPARAM=MulticoreParam(3))
  • table(sce$scDblFinder.class)
  • singlet doublet
  • 122418 18187
  • scRNA_harmony <- as.Seurat(sce)
  • DimPlot(scRNA_harmony, reduction = "umap", group.by = "scDblFinder.class", raster = FALSE)

 

 

主要结果说明 

 

img2

scDblFinder双细胞估计结果

 

说明:直接给出每个细胞的单细胞(singlet)或双细胞(doublet)标签。分析结束会将双细胞估算结果添加到meta.data中,后续可根据该表进行单细胞筛选。

 

 

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