客户文章 | CAV1-DOT1L：胰腺癌血管拟态的关键轴
胰腺导管腺癌是最致命的实体恶性肿瘤之一，现有抗血管生成疗法效果不佳，而血管生成拟态作为一种非内皮依赖性血管化模式，在该疾病中发挥着重要作用，但其调控机制尚不明确。
2026年3月18日，吉林大学第一医院在Gut发表的一项研究“CAV1-DOT1L axis in TAM-derived EVs orchestrates VM and sensitises PDAC to combined VM and VEGF targeting”，阐明肿瘤相关巨噬细胞，特别是M2型，通过分泌细胞外囊泡，将其中的caveolin-1蛋白递送至肿瘤细胞，进而与甲基转移酶DOT1L相互作用，通过表观遗传上调自噬相关基因ATG5的表达，从而驱动血管生成拟态的形成及肿瘤恶性进展。
本研究中外泌体蛋白检测服务由SBC负责。
文章详情
文章题目：CAV1-DOT1L axis in TAM-derived EVs orchestrates VM and sensitises PDAC to combined VM and VEGF targeting
中文题目：TAM来源EV中的CAV1-DOT1L轴调控VM并使PDAC对VM与VEGF联合靶向治疗敏感
发表时间：2026.3
期刊名称：Gut
研究样本：配对PDAC组织和癌旁；VIM-high肿瘤组织 vs VIM-low肿瘤组织；
组学技术：单细胞转录组测序、空间转录组测序、外泌体蛋白组、CUT&Tag、转录组测序、WB、类器官、qPCR等
doi: 10.1136/gutjnl-2025-337293
技术路线
研究内容
1、胰腺导管腺癌中血管生成拟态的组织学和分子学证据
与传统CD31⁺内皮衬覆血管不同，血管生成拟态（VM）被定义为包含红细胞的PAS⁺/CD31⁻血管样通道。本文整合组织学染色、组织透明化与三维成像以及单细胞RNA测序，均显示PDAC中存在丰富的PAS⁺/CD31⁻血管生成拟态结构（相邻的非肿瘤组织中不存在），以及传统的CD31⁺内皮血管。在临床上，血管生成拟态密度随病理分期的进展而逐渐增加，在III期胰腺导管腺癌肿瘤中明显高于I-II期肿瘤，且与不良预后相关。
将胰腺导管腺癌样本分为VM-High和VM-Low两组，单细胞测序结果显示，二者整体细胞虽然组成大致相似，VM-High肿瘤却更多的富集上皮分化、形态发生以及上皮-内皮转化相关的通路，血管生成拟态相关基因集评分显著更高，这种富集由特定的导管细胞亚群驱动；在VM-High肿瘤中，巨噬细胞和中性粒细胞的丰度显著更高，同时星状细胞增加，成纤维细胞减少。空间转录组结果显示在血管生成拟态生态位内有显著的巨噬细胞聚集。
总之，这些分析证实了胰腺导管腺癌中血管生成拟态的功能性存在，以及一个与血管生成拟态形成相关的、空间上独特的巨噬细胞富集生态位。
2、M2样肿瘤相关巨噬细胞促进胰腺导管腺癌中血管生成拟态的形成和肿瘤进展
细胞互作结果显示，巨噬细胞与导管细胞之间存在密集的相互作用，且在VM高表达肿瘤中相互作用频率更高，与既往研究中提示巨噬细胞参与VM形成一致。多色免疫荧光结果中，CD206⁺ M2样肿瘤相关巨噬细胞在空间上富集于PAS⁺/CD31⁻血管生成拟态通道周围，CD206的荧光强度与VM密度呈显著正相关，而iNOS⁺ M1巨噬细胞则较为稀疏。
体外共培养实验表明，肿瘤相关巨噬细胞可诱导肿瘤细胞获得内皮样表型（增强的管形成能力、 Dil-Ac-LDL摄取、侵袭迁移能力）；体内共注射模型进一步验证，肿瘤相关巨噬细胞显著加速肿瘤生长，并增加VM结构数量。这些结果共同确立了M2样肿瘤相关巨噬细胞作为血管生成拟态形成的关键驱动因素。
3、肿瘤相关巨噬细胞来源的细胞外囊泡促进胰腺导管腺癌中血管生成拟态的形成和肝转移
研究表明，细胞外囊泡是细胞间通讯的关键介质，可促进肿瘤进展和转移。中性鞘磷脂酶抑制剂GW4869可显著抑制胰腺导管腺癌细胞的管形成，分支数和管状面积均显著减少，减弱了肿瘤相关巨噬细胞介导的侵袭和迁移增强作用。
分离出的肿瘤相关巨噬细胞-细胞外囊泡单独处理即可直接诱导肿瘤细胞形成血管生成拟态、增强侵袭能力并上调内皮样标志物。在动物模型中，肿瘤相关巨噬细胞-细胞外囊泡显著促进原位肿瘤生长和肝转移灶形成，同时增加瘤内血管生成拟态数量。
4、蛋白质组学鉴定CAV1是驱动血管生成拟态形成和转移的关键肿瘤相关巨噬细胞-细胞外囊泡分子货物
对对照巨噬细胞和肿瘤相关巨噬细胞来源的细胞外囊泡进行了定量蛋白质组学分析。结果显示CAV1在肿瘤相关巨噬细胞来源的细胞外囊泡中富集，为连接多个肿瘤相关、细胞外囊泡相关和血管生成相关通路的核心枢纽。与正常胰腺相比，CAV1在肿瘤组织中的表达显著上调，并且与更差的总生存期和无进展生存期相关。在各类模型中，CAV1被敲低后其促肿瘤作用、VM生成显著减弱。
5、肿瘤相关巨噬细胞来源细胞外囊泡到胰腺导管腺癌恶性进展的分子通路及治疗策略
结果表明，肿瘤相关巨噬细胞来源的细胞外囊泡中的CAV1蛋白与甲基转移酶DOT1L直接相互作用，促进DOT1L在细胞外囊泡中的装载及其向肿瘤细胞的递送；递送至肿瘤细胞的DOT1L通过催化组蛋白H3K79me2修饰，在表观遗传水平上调自噬相关基因ATG5的转录，进而驱动血管生成拟态形成和肿瘤侵袭。靶向这一通路的关键节点DOT1L虽能有效抑制血管生成拟态和肿瘤进展，但会意外诱导代偿性内皮血管生成，而将DOT1L抑制剂EPZ-5676与抗血管内皮生长因子受体药物阿昔替尼联用，则可同时阻断血管生成拟态与代偿性血管生成，实现协同增效的抗肿瘤效果。
文章总结
研究确立了血管生成拟态作为胰腺导管腺癌中一个具有临床相关性但未被充分探索的血管化程序，并确定肿瘤相关巨噬细胞通过细胞外囊泡介导的CAV1-DOT1L-ATG5信号通路成为关键调控者。使用EPZ-5676联合阿昔替尼同时靶向血管生成拟态和血管内皮生长因子信号通路，可同时消融血管生成拟态和血管生成，实现优越的肿瘤控制且无显著毒性。
